Diamond Viru-S-开启病毒纯化新思路-技术前沿-资讯-生物在线

Diamond Viru-S-开启病毒纯化新思路

作者:博格隆(浙江)生物技术有限公司 暂无发布时间 (访问量:874)

病毒纯化的新挑战

在疫苗与病毒载体产业快速发展的今天,传统纯化方式(如离子交换、分子筛层析)仍被广泛使用,但它们往往面临以下问题:

• 选择性不足,杂质去除有限

• 柱效下降快,拆装柱频繁

• 工艺周期长,放大受限

Bestchrom推出的病毒亲和层析介质Diamond Viru-S,正是为解决这些痛点而生。以特异识别取代非特异分离,带来更快、更稳、更高通量的病毒纯化体验。

基于硫酸化多糖识别的广谱亲和机制

Diamond Viru-S采用高刚性Diamond琼脂糖基架,结合糖酐硫酸盐 (Dextran Sulfate) 配基构成。

该配基属于硫酸化多糖类结构,其磺酸基团(–SO₃⁻)可与病毒包膜蛋白表面富含阳离子氨基酸残基(如Lys、Arg)通过静电作用与氢键相互作用形成复合结合,实现对多种带膜病毒的选择性吸附。

文献研究表明,硫酸化多糖能够通过与病毒包膜蛋白受体结合区域的阳离子位点发生静电吸附,从而抑制或富集病毒颗粒(Front. Microbiol., 2019;Nature Biotechnol., 1993)。这种机制赋予Diamond Viru-S对多种病毒体系的广谱结合能力,包括流感病毒、呼吸道合胞病毒 (RSV)、黄热病毒、慢病毒载体等。

因此,Viru-S可用于病毒疫苗及病毒载体的捕获与中度纯化阶段,在低反压下实现高流速运行,显著提升工艺通量。

核心优势

• 高刚性,低反压

支持高流速运行,反压低、装柱简便,适合大规模连续化操作。

• 广谱亲和力

对多种包膜病毒均具有相似亲和性,一介质即可适配多类型病毒或疫苗工艺。

• 优异化学稳定性

耐受NaOH清洗,可重复循环使用,延长填料寿命。

操作参数指南

Diamond Viru-S不允许在高电导率下结合。原因在于在低离子强度溶液中,由于带负电的硫酸根基团的排斥,硫酸葡聚糖聚合物将会完全伸展;在高离子强度溶液中,聚合物会收缩并与去离子化葡聚糖更相似。

当处理流感病毒时,建议导电率小于5 mS/cm, pH值建议在6.8~7.8之间。 装柱完成后,在进行纯化操作前建议先进行空白运行,包括在位清洗(CIP)。用5CV的平衡缓冲液平衡柱子,直到柱流出物显示稳定的导电率和pH值。 

• 缓冲液:首选磷酸盐缓冲液,pH范围在中性6.8~7.8之间,如20mM磷酸钠pH6.8;

• 流速:根据柱子的高度一般选用90~500cm/h的流速,柱高越大流速越慢; 

• 样品准备:为防止样品堵塞柱子,在上样前样品需要用0.45μm的微孔滤膜过滤,并将样品的pH和电导率调整到与平衡缓冲液一致,(可以采用稀释、超滤以及用Bestdex G-25置换缓冲液的方式调整样品的pH和电导率);

• 平衡:用平衡缓冲液清洗层析柱至出口处的缓冲液的pH和电导率与平衡缓冲液基本一致,通常需要3~5倍柱床体积;

• 上样:根据样品中的物质含量和Diamond Viru-S的结合载量确定上样体积,进行上样;

• 清洗:用平衡缓冲液清洗掉未结合的样品至紫外吸收接近基线;

• 洗脱:可以采用线性梯度或者步级梯度增加洗脱液中的洗脱强度,用洗脱缓冲液(如含有1.5 M NaCl的20mM磷酸钠,pH7.4)洗脱病毒。

典型应用

• 重组 RSV 疫苗纯化

• 流感病毒疫苗纯化

• 慢病毒载体浓缩与精纯

结语

从离子交换到特异识别,从传统层析到高效亲和,Diamond Viru-S 以其高亲和性、广谱适应性和可放大性能,为病毒纯化工艺带来更稳健的解决方案。

 

Bestchrom,助力病毒纯化迈向新阶段。

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产品名称 规格 货号
Diamond Viru-S 25mL AA0441

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参考文献

[1]Frontiers in Microbiology (2019) – Sulfated Polysaccharides and Their Interaction with Viral Envelope Proteins.

[2]Nature Biotechnology (1993) – Virus Harvesting and Affinity-Based Liquid Chromatography.

[3]Purolite Application Note (2023) – Affinity Chromatography for Viral Capture and Clarification.

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